按分离机理划分，液相色谱***常用4大类色谱柱，对应分离4类物质，气相单独补充说明。
一、反相色谱柱（RP，市场占80%）
适用物质
弱极性～中等极性有机物
药物、香精、食品添加剂、抗生素、氨基酸衍生物、小分子有机物、农药、多环芳烃、维生素、激素。
固定相
C18、C8、C4、苯基、C30（烷基键合硅胶），疏水。
流动相
水+甲醇/乙腈（极性流动相）
分离原理
疏水作用：极性物质溶于水相先出峰；疏水性强的有机物吸附在烷基碳链，洗脱慢、保留久。
特点
通用性***强，绝大多数样品***。
二、正相色谱柱（NP）
适用物质
中强极性、无疏水基团化合物
糖类、异构体、手性前体、油脂、脂溶性维生素、醛酮、醇、酚、环氧、硅胶柱测油脂。
固定相
硅胶、氨基、氰基、二醇基（极性填料）
流动相
正己烷、二氯甲烷、异丙醇等非水有机溶剂
分离原理
极性吸附：极性越强，与填料吸附越强，出峰越晚。
特点
不能进水相；适合异构体、脂类，极性越大保留越强，和反相完全相反。
三、离子交换色谱柱（IEX）
适用物质
带电离子型化合物
蛋白、多肽、核酸、氨基酸、有机酸、无机盐、抗生素盐、多糖离子衍生物。
细分两类
阳离子交换：分离带正电物质（蛋白、碱金属、胺类）
阴离子交换：分离带负电物质（有机酸、核酸、磷酸盐）
固定相
带带电基团树脂/硅胶：磺酸基（阳）、季铵盐（阴）
流动相
水溶液缓冲盐（磷酸盐、醋酸盐）
分离原理
静电吸附：电荷相反相互吸引，靠盐浓度竞争洗脱。
特点
专门分离离子、生物大分子，pH、盐浓度直接控制保留。
四、尺寸排阻色谱（凝胶渗透GPC/凝胶过滤GFC）
适用物质
高分子，按分子量大小分离
多糖、蛋白、多肽、塑料聚合物、树脂、大分子寡糖。
细分
GFC水相：水溶性大分子（蛋白、多糖）
GPC有机相：油溶性高分子（塑料、橡胶）
固定相
多孔凝胶/硅胶小球，内部有孔洞
分离原理
分子筛效应：
小分子钻进孔洞，路径长，出峰晚；
大分子进不去孔洞，直接流出色谱柱，先出峰。
特点
不看极性、电荷，只看分子体积/分子量，测分子量分布专用。
补充：气相色谱GC色谱柱（气相专用）
分离物质
易挥发、热稳定、低沸点有机物：烃类、醇酯、香料、溶剂残留、农药残留、油品。
分类
非极性柱（DB-5）：弱极性烃类
极性柱（DB-Wax）：醇、酸、醛等极性挥发物
原理
气液分配，沸点+极性共同决定保留。
四大液相柱核心区别速记
反相：水相流动相，疏水性越强出峰越晚，小分子有机通用
正相：纯有机流动相，极性越强出峰越晚，脂类异构体
离子交换：缓冲盐水相，靠电荷分离离子/生物蛋白
排阻：分子筛，大分子先出、小分子后出，只分分子量
